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m6A DNA甲基化定量檢測試劑盒(比色法)
眾所周知,在真核生物中,m6A (N6-methyladenosine)是在RNA分子中最常見的和豐富存在的。DNA m6A同樣也是在多細(xì)胞真核生物包括新桿狀線蟲和果蠅被鑒定和識(shí)別;此外,在更高等的真核生物包括植物,小鼠和人類細(xì)胞中也被識(shí)別。在DNA復(fù)制,轉(zhuǎn)座,轉(zhuǎn)錄和細(xì)胞的防衛(wèi)中m6A扮演著非常重要的作用。在人類中,DNA m6A修飾是由復(fù)雜METTL3甲基轉(zhuǎn)移酶催化得來并由α-ketoglutarate(a-KG)-和Fe2+-加雙氧酶例如:ALKBH5和TET-凝血酶樣酶(like enzymes)去除。結(jié)果表明在許多生物過程中,如:從發(fā)育和新陳代謝到生育,METTL3和 a-KG/Fe2+-dependent加雙氧酶扮演著重要角色。在DNA上m6A修飾的全動(dòng)態(tài)和反應(yīng)的可逆性的化學(xué)特性同樣可以作為表觀遺傳的新奇的生物標(biāo)志物且有重要的生物學(xué)意義。 m6A修飾的負(fù)調(diào)控在人類的腫瘤細(xì)胞和組織中,相較于他們正常的對(duì)照組,首次發(fā)現(xiàn)特征非常明顯。在腫瘤中發(fā)現(xiàn) m6A 是最為普遍的一種DNA修飾。除此之外,在腫瘤細(xì)胞中,相較于初級(jí)細(xì)胞/組織包含有相當(dāng)?shù)土康?DNA m6A (<0.001%),在體外培養(yǎng)的人類細(xì)胞(0.03%-0.22%)中發(fā)現(xiàn) m6A 修飾有數(shù)百倍的增長。 因此,在基因組水平識(shí)別檢測m6A DNA甲基化和分布研究可以提前了解生物過程的表觀遺傳調(diào)控,并為疾病的診斷和治療的提高提供更多有用的信息。作為唯一一款可以在市場上,購買到的商業(yè)化產(chǎn)品,可以用來定量檢測 m6A DNA甲基化。
基于色譜技術(shù)分析的如:HPLC-ECD和LC-MS 在細(xì)胞和組織上檢測 m6A DNA。然而,這種方法耗時(shí)并且通量低,成本高。為了解決這些問題,IVDSHOW為您提供了 m6A DNA甲基化定量檢測試劑盒(比色法)這款試劑盒采用獨(dú)特步驟可以直接從細(xì)胞/組織等各種樣本中提取好的DNA,來定量檢測 m6A DNA甲基化程度。
在mRNA中m6A甲基化是可逆的(文獻(xiàn)1)
對(duì)于細(xì)胞與組織等樣本,m6A DNA甲基化定量檢測試劑盒(比色法) 具有以下優(yōu)勢特:
- 類似于Elisa步驟的比色法檢測方便快速。整個(gè)操作步驟可在3小時(shí)45分鐘完成;熒光法更短。? 類似于Elisa步驟的比色法檢測方便快速。整個(gè)操作步驟可在3小時(shí)45分鐘完成;熒光法更短。
- 高敏,檢測的最低下限為 5 pg 的 m6A;熒光法更靈敏 。
- 96孔可拆卸板模式使研究人員能根據(jù)自己需要選擇手工或是高通量模式分析。
- 操作簡便、可信、分析條件始終如一。
- 獨(dú)特的結(jié)合液容許>100 nts 的DNA緊緊的結(jié)合在條孔上,可以定量檢測未損傷的完整的DNA和片段化的DNA比如:碎片DNA(ChIPed DNA)。
- 優(yōu)化的抗體和增強(qiáng)劑溶液配方可更好更特異的定量檢測m6A,對(duì)于特定片段腺苷濃度范圍的未甲基化樣本DNA不會(huì)產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
- 包括通用型的陰性和陽性對(duì)照,對(duì)于來自任何種屬的m6A都可以實(shí)現(xiàn)定量檢測。
產(chǎn)品組分
組分內(nèi)容 |
型號(hào):A-P-9010-48(48次) |
型號(hào):A-P-9010-96(96次) |
儲(chǔ)存溫度 |
|
WB |
10X Wash Buffer |
14 ml |
28 ml |
4°C |
BS |
Binding Solution |
5 ml | 10 ml | 室溫 |
NDC |
Negative DNA Control,100ug/ml * |
10 ul |
20 ul |
-20°C |
PC |
Positive Control,200ug/ml m6A,1ug/ml * |
10 ul |
20 ul |
-20°C |
CA |
Capature Antibody,1000X* |
5 ul | 10 ul | 4°C |
DA |
Detection Antibody,1000X* |
6 ul | 12 ul | -20°C |
ES |
Enhancer Solution |
5 ul | 10 ul | -20°C |
DS |
Developer Solution |
5 ml | 10 ml | 4°C |
SS |
Stop Solution |
5 ml |
10 ml |
室溫 |
8-聯(lián)管 |
8-Well Assay Strips(With Frame) |
6 |
12 |
4°C |
操作手冊 |
|
1 |
1 |
室溫 |
文件資源
文件下載 | 文件內(nèi)容 | 資源說明 |
A-P-9010-m6A DNA甲基化定量檢測試劑盒(比色法) | 操作手冊 | |
A-P-9010-m6A DNA甲基化定量檢測試劑盒(比色法)相關(guān)說明 | 宣傳單頁 |
注意事項(xiàng)
保存建議 | 推薦藍(lán)冰或冰袋運(yùn)輸。當(dāng)您收到產(chǎn)品后,按照說明書建議保存各組分。 |
警告 | 本品僅供科研使用,請勿用于臨床與診斷。 |
FAQ
Q:其中試劑組分:binding Solutions在 m6A DNA甲基化定量檢測試劑盒(比色法)【A-P-9010】與m6A RNA甲基化定量檢測試劑盒(比色法)【A-P-9005】中是否一樣呢?
A:是的。
Q:可以采用m6A RNA甲基化定量檢測試劑盒(比色法)【A-P-9005】中的陽性對(duì)照(m6A RNA)替代m6A DNA甲基化定量檢測試劑盒(比色法)【A-P-9010】中的陽性對(duì)照(m6A DNA)嗎?
A: 因?yàn)闈舛炔煌訟-P-9005中的陽性對(duì)照不能用于A-P-9010。
Q:砷在處理樣品中會(huì)干擾甲基化檢測嗎?
A:砷不會(huì)影響甲基化的檢測。
Liu Z et. al. (November 2023). DNA methylation on C5-Cytosine and N6-Adenine in the Bursaphelenchus xylophilus genome. BMC Genomics. 24(1):671.
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推薦產(chǎn)品
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